Реферати » Реферати по біології » Ветеринарно-санітарна оцінка варених ковбас при використанні різних добавок

Ветеринарно-санітарна оцінка варених ковбас при використанні різних добавок

пробірки продуванием, відібрали 1 куб. см отриманого розчину і перенесли в стерильну чашку Петрі, злегка відкриваючи кришку.
Для посіву 0,01 г продукту приготували наступне розведення:
Інший стерильною піпеткою ретельно перемішали вміст пробірки продуванием, відбирають 1 куб. см і перенесли в пробірку з 9 куб. см стерильного фізіологічного розчину. 1 куб. см випробуваного розчину вторинного розведення містить 0,01 г випробуваного продукту. 1 куб. см цього розчину перенесли в стерильну чашку Петрі, як описано вище. При необхідності таким же чином готували наступні розведення.
Після внесення розведення аналізованої суспензії в чашці Петрі чашку залили
12-15 куб. см розплавленого та охолодженого поживного агару при фламбирования країв пробірки або пляшки, де він утримується. Швидко змішували з мясопептонний поживним агаром, обережно нахиляючи або обертаючи чашку по поверхні стола. Необхідно уникати утворення бульбашок повітря, незалітих ділянок дна чашки, попадання середовища на краю і кришку чашки. Для того, щоб перешкодити розвитку на поверхні спороутворюючих мікробів і бактерій групи протея в Н-формі, допускають нашарування розплавленого і охолодженого до температури 45-50 ° С холодного агару товщиною 3-4 мм.
Після застигання агару, чашки Петрі перевертали і поміщали в термостат в температурою 37 ° С на 48 годин. Через 48 годин підраховували загальне число колоній бактерій, які виросли на чашках. Колонії, що виросли на поверхні, а також в глибині агару, підраховували за допомогою лупи з п'ятиразовим збільшенням або спеціальним приладом з лупою. Для цього чашку клали догори дном на чорний фон і кожну колонію відзначали з боку дна тушшю або чорнилом для скла.
Для визначення загальної кількості мікробів в 1 г продукту підрахована кількість колоній множили на ступінь розведення аналізованого продукту.
За кінцевий результат визначення кількості бактерій в 1 г аналізованого продукту брали середнє арифметичне результатів підрахунку двох чашок різної маси продукту.
Визначення бактерій групи кишкової палички в 1 г продукту. Суть методу полягає в здатності бактерій групи кишкової палички розщеплювати глюкозу і лактозу. При цьому в середовищах «ХБ» , Хейфеца і КОДА утворюються кислі продукти, що змінюють колір індикаторів, а в середовищі «Кесслер» в поплавці утворюється газ внаслідок розщеплення глюкози.
Мета визначення цієї групи бактерій - перевірка дотримання режиму при варінні ковбас.
При мікробіологічному контролі ковбасних виробів у виробничих лабораторіях можна обмежуватися виявленням бактерій з групи кишкової палички без їх біохімічної ідентифікації.
В пробірки, що містять по 5 куб. см середовища «ХБ» , середовища Хейфеца подвійний концентрації або середовища КОДА, вносили по 5 куб. см випробуваної суспензії стерильною піпеткою місткістю 5-10 куб. см з широким кінцем.
Допускається застосування середовища Кесслер по 10 куб. см.
Пробірки з середовищами «ХБ» , Кесслер, Хейфеца і КОДА помістили в термостат з температурою 37 ° С на 18-20 годин.
При зростанні бактерій групи кишкової палички середовища «ХБ» і КОДА фарбувалася в жовтий колір, середа Хейфеца набувала також жовтий колір, який може змінюватися до салатно-зеленого, на середовищі Кесслер в поплавці утворюється газ.
Для остаточного висновку про присутність в продукті бактерій групи кишкової палички проводили висів з середи Кесслер (заграв пробірки) або Хейфеца (змінили кольору середовища) в чашки Петрі з середовищем Ендо або
Плоскирева, або Левіна. Чашки Петрі поміщали в термостат з температурою 37 °
С. Через 18-20 годин посіви переглядали. На середовищі Ендо бактерії групи кишкової палички утворюють темно-червоні колонії з металевим блиском або рожево-червоні без блиску, на середовищі Плоскірєва - цегляно-червоні з глянцевою поверхнею, на середовищі Левіна - темно-фіолетові колонії або фіолетово-чорні блискучі. З підозрюваних колоній готували мазки, які фарбували по Граму.
Специфічне зміна середовища «ХБ» і КОДА не вимагає подальшого підтвердження.
При завідомо високою обсіменіння аналізований продукт масою не більше
0,25 г поміщали в порожню пробірку, в яку закладали грудочку стерильної фільтрованої паперу розміром 5 Ч 5 см, і стерильною скляною паличкою або фламбіровать дротом підштовхували матеріал до дна (Не ущільнюючи), в пробірку наливали середу «ХБ» , КОДА або Хейфеца (нормальної концентрації), заповнюючи її на 34 висоти пробірки. Пробірки поміщали в термостат з температурою 37 ° С. на 8-10 годин. При зростанні бактерій групи кишкової палички на середовищі Хейфеца середу змінює свій колір з червоно-фіолетового в жовтий, який потім може змінюватися до салатно-зеленого.
Виявлення грамнегативних паличок, специфічно змінюють колір рідких диференційно-діагностичних середовищ і створюючих характерні колонії на елективних середовищах з лактозою, вказує на наявність бактерій групи кишкової палички.
Визначення бактерій з роду сальмонел в 25 г продукту. Суть методу полягає у визначенні характерного зростання сальмонел на елективних середовищах та встановленні біохімічних і серологічних.
Наважку продукту масою 25 г від об'єднаної проби вносили у флакон
Сокслета, що містить 100 куб. см середовища збагачення (Мюллера, Кауфмана, хлорістомагніевой середовища М). Рідина у флаконі повинна піднятися до мітки
125 куб. см. Флакони ретельно струшували і поміщали в термостат з температурою 37 ° С. Через 16-24 год після ретельного перемішування за допомогою бактеріологічної петлі (діаметр 0,4 - 0,5 мм) або пастерівської піпетки проводили посів з середовища збагачення в чашки Петрі з попередньо підсушеної середовищем Ендо, БФА, Плоскірєва, Левіна або вісмут-сульфіт-агар
(за вибором).
Чашки з посівами поміщали в термостат з температурою 37 ° С; посіви переглядали через 16-18 годин.
На середовищі Ендо бактерії з роду сальмонел утворюють безбарвні або з рожевим відтінком колонії.
На середовищі БФА сальмонели утворюють великі, гладкі, червонуватого відтінку прозорі колонії (колонії сальмонели тіфі суїс, як і на середовищі Ендо - дрібні). Бактерії групи кишкової палички утворюють колонії желто-зеленуватого кольору. Бактерії групи протея дають зростання через 72 години.
На середовищі Плоскірєва сальмонели ростуть у вигляді безбарвних колоній, але колонії більш щільні і трохи меншого розміру, ніж на середовищі Ендо.
На середовищі Левіна сальмонели ростуть у вигляді прозорих, блідих ніжно-рожевих або рожево-фіолетових колоній.
На вісмут сульфитном агарі сальмонели ростуть у вигляді чорних або коричневих колоній з характерним металевим блиском. При тому спостерігається прокрашивание в чорний колір ділянки середовища під колонією. Виняток становлять деякі серологічні типи з групи С, які на цьому середовищі ростуть у вигляді ніжних світло-зелених або сірувато-зелених колоній.
Ізольовані колонії, характерні для бактерій з роду сальмонел, пересівали на Трьохцукровий агар Крумвіде-Олькеніцкого в модифікації
Ковальчука штрихом по скошеної поверхні і уколом в стовпчик. Посіви поміщали на 12-16 годин в термостат з температурою 37 ° С.
При зростанні бактерій з роду сальмонел колір скошеної поверхні середовища
Крумвіде-Олькеніцкого в модифікації Ковальчука - рожевий, стовпчик - желто-бурий; газоутворення встановлюють по наявності тріщин і розриву стовпчика агару, сероводородообразующіе - викликають потемніння стовпчика.
Інші грамнегативні бактерії дають такі зміни кольору середовища:
. Бактерії групи кишкової палички - вся середу забарвлюється в синій або синьо-зелений колір з утворенням газу або без нього;
. Бактерії з групи протея - середа забарвлюється в яскраво-червоний колір, може утворитися чорний осад;
. Шигели і збудники черевного тифу - косяк забарвлюється в рожевий колір, стовпчик - в синій, або синьо-зелений.
Допускається замість середовища Крумвіде-Олькеніцкого в модифікації Ковальчука посів на вуглеводні середовища в короткий строкатий ряд, включаючи середовища з глюкозою, лактозою, сахарозою, манітом, і мальтозою, напіврідкий агар уколом (для визначення рухливості) і бульйон Хоттингера для визначення освіти індолу і сірководню.
Для подальшої ідентифікації бактерій готували мазки, які фарбували по
Граму, мікроскопіровать і вивчали серологічні властивості мікроорганізмів шляхом постановки пробної аглютинації на предметному склі з агглютинируют адсорбированной полівалентній сальмонеллезной О-сироваткою.
При отриманні позитивної реакції на склі з полівалентною сироваткою проводили ідентифікацію за допомогою монорецепторними агглютинирующих О-сироваток.
Встановивши серологическую групу, до якої відносяться досліджувані бактерії, за допомогою Н-сироваток визначали тип бактерій.
Виявлення рухомих (крім S. Pullorum & S. Gallinarum) грамнегативних паличок, що дають характерний зростання на елективних середовищах, неферментирующих лактозу і сахарозу, ферментуючих глюкозу і маніт з утворенням кислоти і газу (S.typhi suis не ферментує маніт), що дають позитивну реакцію аглютинації з монорецепторними О-і Н-сальмонельозний сироватками, вказує на наявність бактерій з роду сальмонел.
Визначення бактерій групи протея. Суть методу полягає у визначенні морфології і зростання на поживних середовищах, здатності гідролізувати сечовину і утворювати сірководень.
Для підтвердження наявності росту протея в Н-формі 0,5 куб.см аналізованої суспензії вносили в конденсаційну воду свіжоскошеного мясопептонного агару, розлитого в широкі пробірки, не торкаючись середовища (метод Шукевича).
Вертикально поставлені пробірки поміщали в термостат з температурою
37 ° С. Через 18-24 год посіви переглядали. Звертали увагу на освіту повзучого вуалеподібного нальоту з блакитним відтінком; на скошеному мясопептонном агарі культура піднімається з конденсационной рідини вгору по поверхні середовища. При появі характерного росту мікробів роду протея, мікроскопіровать забарвлені по Граму мазки і вивчали рухливість мікробів в розчавленої або висячої краплі.
Для виявлення нероящиеся О-форм можна проводити посів на поверхню агару Плоскирева. О-форма протея зростає на цьому середовищі у вигляді прозорих колоній, злегка подщелачівающіх середу, фарбуючи її в жовтий колір. Робили пересівання матеріалу з підозрілих колоній в середу Крумвіде-Олькеніцкого в модифікації Ковальчука, де за наявності бактерій з групи протея середу забарвлюється

Сторінки: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

енциклопедія  з сиру  аджапсандалі  ананаси  узвар