Реферати » Реферати з біології » Біологічна характеристика збудників вірусних трансфузійних гепатитів

Біологічна характеристика збудників вірусних трансфузійних гепатитів

1,24 г/см3 для віріонів з порожньою серцевиною, відображає внесок нуклеїнової кислоти в нуклеокапсиди. Ліпідний аналіз дає суміш ліпідів [5,7,3,15].

Середня молекулярна маса HBsAg / adw дорівнює 3,7 * 106 - 4,6 * 106. при ізоелектричному фокусуванні препаратів (22 нм) - частинок HBsAg виявляється кілька популяцій з різними значеннями pI від 3,65 до 5,3. Середній коефіцієнт сідіментаціі для HBsAg варіює від 39 S до 54 S. Визначення середнього питомої коефіцієнта екстинкції 1% р-ра очищеного білка HBsAg при 280 нм лежить в межах від 37,3 до 60,0 [13].

Методом електорофореза в ДСН - ПААГ в очищених препаратах (22 нм) - частинок HBsAg adw-, ayw - і adr - підтипів виділено 7 або більше поліпептидів з молекулярною масою від 25000 до 100000. У зв'язку з тим, що зовнішня оболонка віріонів HBV містить HBsAg і ліпіди (частково взяті у клітини господаря), припустили, що вона хімічно схожа на 22 нм частинку
HBsAg [5,7,15].

1.2.3 Структура вірусних нуклеокапсидов.

Серцевина віріона несе серцевинний антиген HBV (HBcAg), який виявлений в крові, як внутрішній компонент віріона. Він іноді визначається в сироватці в ранній період віремії до появи антитіл до HBсAg.
Дослідження показали, що значна фракція HBсAg - частинок, виділених з віріонів і менша фракція їх виділена із зараженої печінки, має високу плавучу щільність в CsCl (1,38 г/см3) і містить ДНК і ДНК - полімеразну активність [1,13,15]. Встановлено, що високоочищені серцевини, отримані з віріонів і HBсAg - частки, виділені з печінки, містять кілька унікальних поліпептидів від 19 до до 38 к. Поліпептид 19 до може реагувати з антитілами е - антигену HBV (анти - HBe) [14,15] .

1.2.3.1 Природа HBeAg

Ідентифіковано в 1972 році; фізично і антигенно відрізняється від HBsAg і HBсAg, важко піддається очищенню, являє собою комплекс антигенів. У огаровом гелі дається до 3 ліній преципітації: е1, е2, е3. в сироватках хворих HBV визначаються як зв'язується з (IgG) HBсAg з молекулярною масою 300 до, так і менший «вільний» HBeAg з молекулярною масою 30 - 35 к. Вільна форма здатна до дисоціації на менші поліпептиди з молекулярною масою 15,5 к. Особливо слід зазначити, виражену кореляцію присутності HBeAg в сироватці хворих з високою концентрацією фізичних вірусних частинок. Є дані, що HBeAg і віріони продукуються разом під час інфекції, крім цього відомо, що HBeAg є компонентом віріона, з якої активно вивільняється при руйнуванні її детергентом
[5,15].

Інформація про HBeAg закладена в С - гені. Численні факти, отримані при вивченні HBV дозволили зробити висновок про зв'язок HBeAg з инфекционностью і наявністю вірусу. Виявилося, що інфекційність сироваток крові з HBeAg в мільйон разів вище, ніж з анти - Hbe. Однак, цей зв'язок не абсолютна. Виявлено мутантні форми HBV, при яких блокується синтез
HBeAg. При цьому, не дивлячись на наявність анти - Hbe в сироватці крові вдається тестувати ДНК - HBV. Дослідження останніх років, пов'язані з вивченням мутантних форм HBV, дозволили по-новому поглянути на значення HBeAg в патогенезі HBV. Припускають, що у матерів носіїв HBV HBeAg, проходячи через плаценту, викликає розвиток імунної толерантності, що приводить до прогресування в хронічний гепатит [7,15].

1.2.3.2 Роль HBxAg

Вважають, що х - антиген є як регуляторним білком, що підсилює синтез вірусних білків, так і можливо, білком, включеним в структуру HBV.
HBxAg відіграє особливу роль у розвитку первинної гепатоклітинна карциноми. Р
- ген, ДНК - полімерази - фермент, інформація про який закладена в ДНК HBV.
Він володіє ферментативної активністю як РНК - залежна ДНК - полімераза і необхідний для добудови внутрішньої короткої ланцюга ДНК HBV в процесі її реплікації [13,15].

1.2.4 Фізична та генетична структура вірусної ДНК.

Віріони HBV мають маленьку кільцеву, частково двухцепочечную молекулу
ДНК. Одноланцюгові ділянки варіюють по довжині, складаючи в різних молекулах від (15 до 60%. Таким чином, ДНК складається з довгого ланцюга L постійної довжини ((3220 підстав) у всіх молекулах і короткою (S), яка в різних молекулах варіює по довжині від 1700 до 2800 підстав.
ДНК полімерази добудовує одноланцюгові ділянки вірусної ДНК до повністю двухцепочечной молекули, що містить приблизно 3200 bр. Синтез ДНК починається на 3 'кінці короткої ланцюга, яка в різних молекулах знаходиться на різних ділянках в межах специфічної області ДНК і закінчується по досягненні 5 'кінця короткого ланцюга, розташованого в суворо визначеній місці. Довга ланцюг не є замкнутим колом: в точці, розташованій приблизно на відстані 300 bp від 5' кінця короткого ланцюга, існує розрив. За допомогою нагрівання при певних умов, яка викликає виборчу денатурацію 300 - нуклеотидної області між
5 'кінцем короткої ланцюга і розривом довгого ланцюга, кільцева ДНК може бути перетворена в лінійну форму з одноланцюжковий липкими кінцями. Лінійна форма може бути знову переведена в кільцеву шляхом реассоціаціі комплементарних одноланцюгових кінців. За мабуть, 5 'кінці обох, як довжиною, так і короткою ланцюгів ДНК HBV блоковані таким чином, що попереджено їх фосфорилювання полінуклеотіназой. Хімічна природа ланцюга ДНК, виділеної з віріонів ковалентно приєднана до поліпептиду, що запобігає її фосфорилювання [7,15].

1.2.5 Механізм реплікації вірусів.

Після проникнення вірусу в клітини печінки в клітинних ядрах формуються замкнуті кільцеві вірусні ДНК, що складаються з 3200 bp. Вони можуть функціонувати як матриці для синтезу вірусної мРНК і синтезу плюс
РНК повної довжини, новосинтезовані вірусна ДНК - полімераза і білок - запал для синтезу мінус - ланцюга ДНК збираються в комплекс з мажорним структурним полипептидом в серцевини вірусу і утворюють серцевину або нуклеокапсид вірусу. Потім всередині нуклеокапсида синтезується мінус - ланцюг вірусної ДНК. У цьому процесі використовується білкова запал і РНК матриця, яка в міру синтезу ДНК деградує під дією РНК ази Н. на матриці мінус - ланцюга ДНК кільцевої конформації синтезується плюс - ланцюг вірусної ДНК. Потім частинки серцевини збираються в повні віріони з HBcAg і ліпідосодержащіх оболонками клітинної мембрани. У разі HBV формування вірусу і виділення його з клітки можуть, відбуватися, очевидно, на будь-який щаблі після складання серцевини, так як віріони (частки Дейна) містять молекули гібридів ДНК - РНК, а також частково одноланцюгові кільцеві ДНК виявляються в крові. Ендогенне ДНК полімерази в вирионах каталізують включення нуклеотидів в мінус - ланцюга ДНК гібридів РНК - ДНК і в плюс - ланцюга ДНК частково одноланцюгових молекул [15].

1.2.6 Чутливість HBV до фізико - хімічних факторів.

Характеризується значною стійкістю, при t =-20Со зберігається до 20 років, не має інактивується при заморожуванні - відтаванні, зберігається при 56 Зі близько доби, а при 60 Со - 30 хвилин. Антиген стійкий до впливу протеолітичних ферментів і органічних розчинників. Під дією ефіру, хлороформу, 1,5% формаліну, 2% р-ра фенолу НЕ інактивується кілька годин. При t = 100 Зі треба кілька хвилин, щоб убити вірус. У сироватці зберігається 6 місяців при 30 - 32 Со. після висушування вірус зберігає життєздатність при 25 Зі близько тижня. При процедурі фракціонування плазми по Кону, більша частина HBV, HBeAg, ДНК - полімерази зберігається в першу фракції (фібриноген, фактор - вісім) або у фракції три (протромбіновий комплекс), тоді як більша частина HBsAg переміщається у фракцію чотири (плазматичних білків), а менша кількість у фракції три і п'ять (альбумін). Після прогрівання HBV до 60З в перебігу 4:00 вірус не інактивується, 10:00 при 60 Со ліквідує його. При 98 Зі інфекційність сироватки частково усувається через 1 хвилину або повністю через 20 хвилин. Сухий жар 160 З руйнує інфекційність через годину. В іншій серії дослідів HBV на протязі 10 хвилин обробляли при 20
Зі одним з п'яти дезинфікуючих препаратів (гепатохлорідом натрію + 500 мг вільного активного хлору на 1 літр; Cidex СХ - 250 + 2% водний р-р глутаральдегида, рН - 8,4; Sporicidin рН - 7,9 + 0,12% - ний глутаральдегід і 0,44% - ний фенол; 70% - ним ізопропиловим спиртом; Weskodine, розведеним 1:213 і містить 80 мг активного йоду на 1 літр) і потім вводили одному шимпанзе. У жодного з п'яти не було відмічено ознак захворювання. На кінець зазначено, що обробка вета - пропілактоном + УФ - променями зменшує титр HBV в плазмі приблизно в 10 млн. разів [14,15].

1.3 Вірус гепатиту D

Вперше виявив Різетто в 1977 році в гепатоцитах під час спалаху сироваткового гепатиту в Південній Європі. Пізніше стали виявляти повсюдно.

Збудником захворювання є дефектний вірус з розмірами віріона
35 - 37 нм. Систематизовано до складу Deltavirus сімейства Togaviridae.
Внутрішній компонент частки складається з РНК з відносною молекулярною масою 500.000. простежується чіткий зв'язок між HBV і DAg. DAg є саттеліти HBV;

Сторінки: 1 2 3 4 5

енциклопедія  з сиру  аджапсандалі  ананаси  узвар