Реферати » Реферати по біології » Генотоксические ефекти у дітей-підлітків з Чебулінского району Кемеровської області

Генотоксические ефекти у дітей-підлітків з Чебулінского району Кемеровської області

1.0pt; border-bottom: solid windowtext 1.0pt; "> 13 - 15 Крапивино 27 15,7 14 - 17

Збір анамнестичних даних проводили шляхом усного анкетування та аналізу індивідуальних медичних карт. У дослідження не включали дітей, що піддавалися вакцинації і рентгендіагностичний процедурам протягом 3-х місяців до збору матеріалу.

2.2. Культивування крові, приготування препаратів хромосом і аналіз цитогенетичних порушень.

Матеріалом для дослідження була цільна периферична кров, яку забирали у донорів в асептичних умовах, з негайним приміщенням у гепаринизированной флакон (0,5% розчин гепарину ф. "Ріхтер"). Посів культур проводили на протязі доби після взяття крові.

Для аналізу хромосом здійснювали підготовку препаратів з використанням стандартного полумикрометодом культивування лімфоцитів [Hungerford et al., 1965]. Фіксацію матеріалу проводили в 3-х змінах охолодженого етанол-оцтового фіксатора (3: 1). Клітинну суспензію розкопували на чисті охолоджені, змочені водою предметні скла. Препарати сушили над полум'ям спиртівки, шифрували і фарбували 2% розчином барвника Гінза.

Облік хромосомних аберацій проводили згідно загальноприйнятим вимогам [Бочков та ін., 1972; Carrano, Natarajan, 1988]. Ахроматические пробіли (гепи) в число аберацій не включали і враховували окремо. Для оцінки цитогенетичних ефектів визначали загальну кількість аберацій та їх якісний спектр на 100 проаналізованих метафаз від кожного донора.

Статистичну обробку фактичного матеріалу проводили з використанням програми "STATISTICA for WINDOWS 5.0"; порівняння експериментальних груп виконували методом непараметричної статистики Манна-Уїтні.

Глава III . Результати та обговорення

Диференційоване каріотипування, проведене в досліджуваних групах, дозволило встановити наявність нормального каріотипу у всіх обстежених дітей (46, ХХ).

Цитогенетический аналіз рівня спонтанних хромосомних аберацій в досліджених групах дав наступні результати (табл.2). З даних наведених у таблиці 2 видно, що середні частоти спонтанної пошкоджуваності хромосом в групах обстежених дітей мають суттєві відмінності, що перш за все відображає неоднакові екологічні параметри середовища в порівнюваних районах. Так, рівень клітин з хромосомними абераціями в групі дітей, які проживають в п.Крапівінcкій склав в середньому 1,77 ± 0,54%, що не перевищує общепопуляціонное значень спонтанного мутагенезу, відомих з літератури [Бочков, Чеботарьов, 1989; Gundy, Varga, 1983]. Таким чином, цитогенетичний аналіз показав, що вплив мутагенних факторів середовища в п. Крапивинського знаходиться на фоновому рівні, а частота хромосомних аберацій, встановлена ??для групи порівняння, по видимому, відповідає популяційному регіонального рівня при відсутності на людину інтенсивного антропогенного впливу [Дружинін та ін. , 1995, 1997].

Разом з цим, в групах дітей, які проживають в Чебулінского районі були зареєстровані середні частоти пошкоджуваності хромосомного апарату, які значно перевищують аналогічні показники у вибірці порівняння (табл.2). Найбільш несприятливі генотоксичні ефекти виявлені в групі дівчаток із с. Усманка (9,96 ± 2,88%); дещо менше значення характерно для групи дітей з с. Дмитрівка (6,08 ± 0,97%), однак і в цьому випадку мається достовірність відмінностей по відношенню до показників мутацій в групі порівняння (Р = 0,000092).

Таблиця 2

Рівень цитогенетичних порушень в обстежених групах

Група

Число

обстежених

Число аберацій

на 100 клітин,%,

(M ± m)

Межі

варіацій,%-%

Усманка 12 9 , 96 ± 2,88 0 - 35,3
Дмитриевка 13 6 , 08 ± 0,97 1,3 - 13,7
Крапивино 27 1,77 ± 0,54 0 - 12,5

* При порівнянні вибірок: "Усманка" і "Крапивино" Р = 0,000312;

"Дмитриевка" і "Крапивино" Р = 0,000092;

"Усманка" і "Дмитрівка" Р = 0,707.

Обговорюючи дані, наведені в табл. 2, можна відзначити, що великі значення стандартної помилки середньої в групах дітей з Чебулінского району (2,88 для вибірки "Усманка" і 0,97 для вибірки "Дмитрівка") свідчать про широку варіабельності цитогенетичної відповіді на мутагенну дію. Дійсно, індивідуальні значення частот хромосомних аберацій варіюють від мінімальних показників до 35,3% аберантних клітин. Цей факт говорить, з одного боку, про існування індивідуальної чутливості до генотоксичну дії. З іншого боку, факт наявності дуже високих частот мутацій хромосом в окремих дітей при повному або майже повній відсутності мутагенного ефекту в іншої частини обстежених дозволяє припустити, що дані вибірки неоднорідні за ступенем впливу кластогенних факторів на окремих їх представників.

Відомо, що ДНК-ушкоджують агенти можуть бути різної природи: фізичної (всі види іонізуючого випромінювання), хімічної (хімічні мутагени) і біологічної (віруси). Для з'ясування причинності спостережуваних в тій чи іншій популяції хромосомних порушень важливе значення має аналіз якісного спектра реєстрованих аберацій [Бочков, 1993]. Підставою для цього служить відомий факт про наявність специфіки в типах утворюються аберацій, характерних для іонізуючого випромінювання, в порівнянні з аберацією, що викликаються хімічними мутагенами [Evans, 1982]. Під впливом опромінення в клітинах частіше виникають аберації хромосомного типу, зокрема - діцентріческіе хромосоми, які вважаються випробуваним індикатором мутагенного впливу радіоактивного випромінювання [Моссе, 1990]. Такий аналіз був проведений на наступному етапі експерименту; його результати представлені на рис.4.

З гістограми видно, що співвідношення одиночних і парних фрагментів хромосом є подібним у двох групах дітей з різних сіл Чебулінского району (63% / 24% для вибірки "Усманка" і 67% / 30% для вибірки "Дмитриевка"). Таке співвідношення аберацій хроматидного і хромосомного типу з явним превалюванням перших над другими вказує на переважно хімічну природу генотоксичних агентів, що діють на дітей з Чебулінского району. Разом з тим, в якісному спектрі мутацій у вибірках "Усманка" і "Дмитрівка" є і певні відмінності. Так у вибірці "Усманка" діцентріческіе хромосоми зустрічалися з частотою 0,87 ± 0,52%, тоді як у вибірці "Дмитрівка" аналогічний показник склав 0,25 ± 0,13%. Слід зазначити, що відмічені частоти діцентроческіх хромосом (особливо у дітей з с.Усманка) є досить високими і перевищують общепопуляціонние значення цього типу аберацій: 0,16% [Bender et al., 1988]. Можна припустити, що причиною появи маркерних для променевого впливу мутацій хромосом у обстежених дітей з Чебулінского району є хронічний вплив малих доз радіації на дану популяцію. Це не здається дивним зважаючи на досить близького розташування с. Усманка від місця підземного випробування ядерної зброї (полігон розташований в 10-15 км. Від цього населеного пункту).

Основна компонента генотоксичних ефектів, виявлених в групах дітей з Чебулінского району, все ж має явну хімічну природу і цей факт змушує шукати джерело ймовірного хімічного забруднення середовища. Так, наприклад, в 5 кілометровій зоні від с. Усманка розташований могильник отрутохімікатів, причому умови зберігання токсичних речовин явно не відповідають нормативам. Можна припустити, що відбувається періодична витік токсикантів у навколишнє середовище, що й спричиняє за собою появу виражених мутагенних ефектів у дітей, що проживають у сільській місцевості. До теперішнього часу можна лише гадати, що дана хімічна сполука (з'єднання) крім ДНК-повреждающей активності, володіє колхіціноподобним дією, руйнуючи веретено поділу клітини, що виражається в появі великої кількості мутацій геномного типу поліплоїдних клітин (рис.4).

Таким чином, результати цитогенетичного обстеження дівчат-підлітків, які проживають в с.Усманка та с. Дмитрівка свідчать про вкрай несприятливою еколого-генетичної обстановці, що має місце в цих населених пунктах Чебулінского району, причому причинами цього неблагополуччя можуть бути фактори як променевої, так і хімічної природи. Наслідком високого рівня мутацій може бути збільшення захворюваності населення району, особливо в частині нозологічних форм, пов'язаних з підвищеною хромосомною нестабільністю: онкопатології, імунодефіцитні стани, порушення репродуктивної функції. Медичні і соціальні наслідки забруднення навколишнього середовища для жителів Чебулінского району повинні стати предметом подальшого вивчення всіх зацікавлених структур: адміністративних, медичних та екологічних.

Висновки.

Результати отримані в даній роботі дозволили сформулювати наступні висновки:

1. Рівень хромосомних мутацій у лімфоцитах крові дівчаток-підлітків, які проживають в селах Усманка і Дмитриевка Чебулінского району достовірно перевищує аналогічний показник в групі порівняння (п.Крапівінскій).

2. Якісний спектр цитогенетичних порушень вказує на поєднане дію хімічних та радіаційних факторів.

3. Вірогідними причинами забруднення навколишнього середовища в Чебулінского районі Кемеровської області є поховання отрутохімікатів і випробування ядерного пристрою.

4. Потрібно подальше вивчення генетичних наслідків забруднення середовища на території Чебулінского району та факторів його викликають.

Список літератури

Ауербах Ш. Проблеми мутагенезу. - М .: Мир, 1978. - с. 443-444.

Бєляєв І.Я., Акиф А.П. Генетичні процеси і проблеми мішені в хромосомному мутагенезі. // Генетика. - 1988. т.24. №8. с. 1384-1392.

Бочков Н.П., Дьомін Ю.С., Лучник Н.В. Класифікація і методи обліку хромосомних аберацій в соматичних клітинах // Генетика. 1972. Т. 8. № 5. С. 133-141.

Бочков Н.П., Чеботарьов О.М. Спадковість людини і мутагени зовнішнього середовища. М .: Медицина, 1989. 272с.

Бочков Н.П. Аналіз типів аберантних клітин - необхідний елемент біологічної

Сторінки: 1 2 3 4 5

енциклопедія  з сиру  аджапсандалі  ананаси  узвар