Реферати » Реферати по біології » Вплив ціано- і тетразольних похідних цитозину і тиміну на резистентність еритроцитів

Вплив ціано- і тетразольних похідних цитозину і тиміну на резистентність еритроцитів

електрохімічних і коллоидно-осмотических властивостей еритроцитів.

У наступній стадії спостерігається руйнування клітинних структур еритроцитів. У ній розрізняють дві фази: o 1 фаза стромопороза, в якій морфологічна цілісність формених елементів ще зберігається, хоча клітини вже вільно пропускають електричний струм; o 2 фаза строматоліза, коли відбувається повний розпад строми еритроцитів.

Фахівцями було показано, що при хімічному гемолизе сферуляціі і розбухання еритроцитів передує етап проникнення гемолітико в клітку [21,71,76]. Можливі два варіанти цього процесу: мембрана може бути проникна і непроникна для гемолітико. У першому випадку гемолітико вільно проникає всередину клітини, порушує впорядкування протоплазматических структур і переводить більшу частину молекул в розчинений стан.
Розпадається також упорядкована упаковка гемоглобіну. Перехід в розчин молекул гемоглобіну підвищує осмотичну активність внутрішньоклітинного вмісту, дрібні звільнені молекули і іони виходять назовні. Великі ліпоїдні і білкові молекули залишаються в клітині, так як оболонка для них непроникна. В результаті цих процесів осмотичний тиск всередині клітини збільшується. Далі гемоліз розвивається за осмотическому шляху.

Якщо ж оболонка клітини непроникна для діючого агента, до процесу гемолізу додається ще один етап. Проникнення гемолітико в клітку передує пошкодження оболонки. В результаті цього мембрана еритроцитів втрачає непроникність для молекул лізину, після чого процес розвивається за раніше описаного шляху [21, 77].

1.3 Реакції червоної крові на вплив хімічних факторів

Відомо, що будь-які дії на організм знаходять своє відображення у змінах системи крові, яка включає в себе як кровотворні органи, так і периферичну кров. Реакція на вплив різних агентів може коливатися в різних межах від різко вираженого токсичного до стимулюючого ефекту, а досліджувані характеристики можуть як суттєво відхилятися від норми, так і не виходити за її межі.

Незалежно від хімічної природи першим патогенним ланкою впливу хімічних факторів є мембраноповреждающій ефект, що супроводжується порушенням функції каскаду мітохондріальних і мікросомальних ферментів - оксигеназ, гидролаз, що беруть участь в детоксикації та елімінації патогенного начала [30, 90]. Багато агенти впливають на білки мембран, сприяючи їх окисленню, денатурації і, як наслідок, утворення пір в ній.
Наприклад, етанол сприяє денатурації білків мембрани, гемин викликає як швидкий, так і повільний гемоліз, окислюючи мембранні білки [3, 59].
Ртуть та її органічні сполуки викликають пошкодження мембрани за рахунок блокади сульфогідрільниегрупи білкових молекул, що входять до складу біомембран [22] .Подавляющее більшість гемолітичних агентів викликає ушкодження мембрани, порушуючи розташування молекул ліпідів в ній. Так олеіновокіслий Na і жовчні кислоти пошкоджують оболонку еритроцита, розчиняючи в ній лецитин, при цьому пошкоджуються більш глибокі частини мембрани [59]. Активні форми O2, H2O2, органічні перекису взаємодіють з ліпідами мембран, утворюють перекису ліпідів, що призводить до структурних порушень і зміни проникності [2]. Ретіноїди індукують перехід еритроцитарних ліпідів з бислойной фази в гексагональну. Отже, стійкість еритроцитів порушується [52]. При карбомілірованіі мембран еритроцитів цианат зв'язується з фосфотіділхолін і фосфотіділсеріном, таким чином розмір пір і їх кількість зростає.
Адреналін викликає процес перекисного окислення ліпідів [14]. Структурні та функціональні зміни мембрани еритроцитів були виявлені при дії толуолу і виражалися в ослабленні зв'язків між ліпідними та білковими компонентами [37].

І.І.Гітельзон і І.А.Терсков [21] показали, що катіони Mg2 + і меншою мірою Ca2 + збільшують стоікость еритроцитів, а Na + і K + практично не змінюють її. З аніонів SO42-дуже різко збільшують сстойкость еритроцитів, а PO43-знижують її. Дослідженнями А.К.Гулевского
[26] показано, що при попередньому низькотемпературному впливі спостерігається наступний ефект: Na +, Ca2 +, Mg2 + сорбируясь на мембрані, міняють її проникність для води та іонів, а також механічні властивості .
Іони K + і Ca2 + знижують стійкість мембрани.

Антигемолітична діям володіють 2-гідроксіламоніевие солі арил-, тво- і арілсульфонілуксусной кислот [59]. Л.Грінбер і А.М. Аллахвердієв виявили підвищення резистентності еритроцитів після додавання форміату
Na та обробки промахіном.

Лікарські препарати також були досліджені на гемолітичну дію. Н.М.Мітрохін із співробітниками [4] досліджували речовини, застосовувані в медичній практики. Вони встановили, що понад 70% досліджених препаратів викликають деформацію еритроцитів. Катіони викликають переважно стоматоліз клітин. Таким механізмом дії володіють димедрол, аміназин, промедолу гідрохлорид та деякі інші препарати.
Аніони викликають ехіноцітоз еритроцитів. Такий вплив характерно для всіх барбітуратів, карцеіна, мединал.

В останні роки фахівці приділяють велику увагу розробці засобів, модулирующих імунні реакції організму. Стало очевидним, що позитивна дія різних лікарських речовин можна пояснити їх здатністю підвищувати загальну опірність організму або його неспецифічний імунітет, а також впливати на специфічні імунні реакції
[65] .Отраженіем неспецифічної резистентності є система крові.
Остання грає роль еффектора і бере участь завдяки особливій реактивності в реалізації адаптаційно-трофічних впливів для збереження сталості внутрішнього середовища організму [21, 23-25, 51, 74, 86].

Підвищення загальної опірності організму відзначено під впливом ряду стимулюючих препаратів. До речовин, котрі виявляють дану здатність, відносять похідні піримідинових підстав [41, 49] У літературі є відомості про те, що сполуки даного класу сприяють синтезу нуклеїнових кислот, білків, збільшують активність імунної системи.

Похідні пиримидинов є антиоксидантами. Механізм їх антиоксидантного ефекту пов'язаний з придушенням перекисного окислення жирних кислот, а також з порушенням утворення супероксидних радикалів. Дані препарати мають захисним ефектом на цитоплазматичному і субклітинному рівні по відношенню до вільних радикалів, які продукують активованими клітинами (макрофагами, нейтрофілами). Лікувальними препаратами цієї групи є Пентаксим, метилурацил, оротовая кислота, сафінор та ін. [77, 90].

Поруч дослідників була вивчена також здатність азолов стимулювати імунологічні процеси і підвищувати загальну опірність організму. У практиці знайшли застосування в цьому зв'язку дибазол, левамізол та ін. [7, 41, 49]. Проте наголошується дозозалежність ефекту, так як при підвищенні доз можливе не імунно-стимулюючу а імунно-депресивний дію [16].

Поряд з позитивним впливом азольних сполук не можна не звернути виймання на наявність побічних ефектів від їх застосування. Серед останніх виділяють гематологічні - анемія і біохімічні - гіпонатріємія і гіперліпідіемія [17].

Таким чином, при впливі різних хімічних речовин на живий організм виникає виражена відповідна реакція з боку червоної крові, причому, характер і сила їх впливів вельми різноманітні.

2. Експериментальна частина

2.1. Матеріали і методика дослідження

Вплив похідних піримідинових підстав на стійкість еритроцитів до дезінтегрується фактору вивчали методом кислотних ерітрограмм.

Досліджували властивості сполук, що мають наступне хімічну будову:

Спостереження проводили in vivo. Було поставлено дві серії експериментів, в яких використовували 36 нелінійних щурів вагою 200-250г. У кожній серії були сформовані дві досвідчені і одна контрольна група.

У першій серії дослідів щурам однієї дослідної групи п'ятикратно внутрибрюшинно з інтервалом в 48 годин вводили по 1 мл розчину цитозину в разової дозі 1 мг / 100 г маси тварини, інший групи розчин ціаноцітозіна в тій же дозі таким чином, що сумарна доза вводиться речовини в обох групах склала 5 мг на 100 г маси тварини. У другій серії дослідів в аналогічних умовах особинами однієї дослідної групи ін'єктували цітозінтетразол, інший - тімінтетразол.Крисам обох контрольних груп вводили фізіологічний розчин в рівному обсязі.

Кров для аналізу брали в ранкові години перед годуванням тварин з кінчика хвоста до початку введення розчинів досліджуваних речовин - вихідні значення, через 2,5 і 24 години після кожного введення, а потім на 3, 5, 7 і
14 добу після закінчення ін'єкцій. Для проведення дослідження 20 мкл крові змішували з 20 мл фізіологічного розчину, отримуючи таким чином суспензія еритроцитів в розведенні 1: 1000.

Всі дослідження проводились при кімнатній температурі.

Вимірювання оптичної щільності суспензії еритроцитів виробляли на фотоелектроколориметр КФК-2 УХЛ 42 при червоному світлофільтрі. В кювету робочої ширини 10 мм вливали 2 мл суспензії еритроцитів з окремої проби і додавали до неї в якості гемолітико 2 мл 0,004 н HCl. Після цього кювету поміщали в кюветодержатель приладу. З моменту введення в суспензію еритроцитів гемолітико величина світлопропускання досліджуваного розчину починала зміняться у зв'язку з руйнуванням клітин крові. Кожні 30 секунд відзначали показання приладу за шкалою екстинкції (Ео). Вимірювання вели до отримання двох співпадаючих показань, тобто до завершення гемолізу (Еn). В результаті отримували ряд убуваючих екстинкції, кожна з яких відповідала ступеня гемолізу до моменту відліку. За значеннями оптичної щільності вираховували відсоток зруйнованих еритроцитів за кожні 30 секунд, приймаючи різницю Ео-Еn за 100%.

Рівень значущості відмінностей визначали за таблицею стандартних значень критерію Стьюдента.

2.2. Результати дослідження

2.2.1. Вплив цитозіна на резистентність еритроцитів

Результати проведених досліджень показали, що цитозин при багатократних введеннях тваринам не зробив істотного впливу на вихідні якісні характеристики еритроцитів. Про це дозволяють судити дані таблиць 1 і 2 (Додаток), в яких представлені усереднені показники оптичної щільності суспензій разрушающихся в ході гемолізу еритроцитів особин дослідної та контрольної групи. Як видно з таблиць, в окремі терміни протягом тривалого періоду спостережень мали місце коливання функціонального стану еритроцитів у порівнянні з вихідним рівнем у тварин обох груп. Звертає на себе увагу ідентичний характер і незначні межі зрушень показників у контрольних і піддослідних особин.

Про фізико-хімічному стані еритроцитів, які зазнали впливу гемолітико, до і на тлі введення тваринам цитозину

Сторінки: 1 2 3